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Debido a su gran versatilidad de aplicaciones que tiene la L-ASNasa sigue siendo un desafío para los investigadores explorar nuevas estrategias para la optimización de su producción a gran escala. Dentro de estas estrategias está la producción de proteínas recombinantes debido a que facilitan los procesos para su obtención. Una de las limitaciones en la producción de L-ASNasa producidas por fuentes bacterianas es que se ha reportado que cerca del 30% de las proteínas recombinantes expresadas en E. coli son insolubles siendo acumuladas como cuerpos de inclusión (IBs), esto quiere decir, que para la obtención de L-ASNasa deben solubilizarse y replegarse a partir de estos IBs, que conlleva a una mala recuperación de la proteína debido a la pérdida de la estructura secundaria disminuyendo su actividad biológica. Debido a esta problemática es que se han desarrollado estrategias asociadas a ingeniería de proteínas y optimización del procesamiento ascendente y posterior, para mejorar la obtención de proteínas soluble como la optimización de cepas bacterianas, promotores, inductores, fases de inducción, así como el uso de péptidos señal N-terminales, que podrían ayudar a secretar las proteínas recombinantes en el medio de cultivo y el uso de aditivos en el medio de cultivo que ayudando a la permeabilización de la membrana y a la liberación de L-ASNasa al espacio extracelular. Una forma de lograr la optimización de estos factores es utilizando diseño de experimentos que son métodos estadísticos que involucran diseños factoriales y metodología superficie respuesta, estos tienen ventajas como el ahorro de tiempo al realizar sólo un número mínimo de experimentos, así como conocer el efecto de interacciones entre los componentes de los medios y entregar un mejor diseño experimental. El objetivo de este proyecto es optimizar el medio de cultivo con aditivos y la fase de inducción para la producción de L-ASNasa quimérica extracelular en E. coli Rosetta (DE3)a escala de matraz de agitación y biorreactor.